Balasubramaniam NAMASIVAYAM : "Détermination des performances de la plateforme NanoBioAnalytique pour la détection et la caractérisation de vésicules extracellulaires : exploration de lysats plaquettaires humain à visée neuroprotectrice"

Résumé : Les vésicules extracellulaires (VE) sont des structures vésiculaires hétérogènes de taille allant de 50 à 5000 nm. Elles sont libérées par tous les types de cellules et difficiles à distinguer en raison de leur hétérogénéité, du chevauchement de leurs propriétés physiques avec d'autres composants de milieux complexes tels que des agrégats protéiques, des lipoprotéines, etc.La plate-forme NanoBioAnalytique (NBA) a été développée en tant que solution analytique multiplexée pour une caractérisation efficace et sans marquage des VE. Il s'agit d'une technique de caractérisation multi-bio-physique composée d'imagerie par résonance plasmonique de surface (SPRi), de microscopie à force atomique (AFM) et de
spectrométrie de masse (MS). Le premier axe de ce travail a consisté à évaluer les performances analytiques de la plateforme NBA pour un échantillon biologique complexe de VE, dérivées des plaquettes (PVE) fourni par l’Université Médicale de Taipei (TMU). Un format multiplex spécifique d'une biopuce a été conçu en utilisant des anticorps contre la protéine CD41 couramment exprimée dans les PVE. Les VEs sont immuno-capturées par une biopuce d'anticorps greffés à deux concentrations différentes et sur une plage de concentration couvrant 4 décades, suivi d’une nanocaractérisation in situ par AFM afin d’étudier leurs caractéristiques structurales et morphologiques. L'analyse quantitative des VE est également effectuée par le dénombrement des VEs, ainsi que par une analyse métrologique fine.(...)

Composition du jury : 

M. Wilfrid BOIREAU, Directeur de recherche, Université Bourgogne Franche-Comté - Directeur de thèse
Mme Céline ELIECAILLE, Maître de conférences, Université Bourgogne Franche-Comté - Co-encadrante de thèse
M. Luc BUEE, Directeur de recherche, Université Lille, Inserm - Examinateur
M. Jérôme DEJEU, Maître de conférences Universite Grenoble Alpes -  Rapporteur
M. Rienk NIEUWLAND, Assistant professor Amsterdam UMC -  Rapporteur
M. Thierry BURNOUF, Professeur Taipei Medical University- Co-directeur de thèse

Localisation : Amphithéâtre J-J Gagnepain, 15B Avenue des Montboucons 25030 Besançon Cedex